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激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)（Laser scanning Confocal Microscopy，簡稱LSCM）是近代生物醫(yī)學圖象儀器的最重要發(fā)展之一，它是在熒光顯微鏡成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針，利用計算機進行圖象處理，從而得到細胞或組織內(nèi)部微細結(jié)構(gòu)的熒光圖象，以及在亞細胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號及細胞形態(tài)的變化。廣泛應(yīng)用于細胞生物學、生理學、病理學、解剖學、組織胚胎學、免疫學和神經(jīng)生物學等領(lǐng)域，對生物樣品進行定性、定量、定時和定位研究具有很大的優(yōu)越性，為這些領(lǐng)域新一代強有力的研究工具。 Fluorescent Microscope Confocal Principle Differences between conventional and confocal microscope 共聚焦顯微鏡的主要優(yōu)點高分辨率：圖像與對比度增強，使用短波長的紫外光，大大提高了分辯率。是普通熒光顯微鏡分辨率的1.4倍（0.51/0.37) 共聚焦顯微鏡應(yīng)用常見錯誤認識 在實際應(yīng)用中盡管幾乎所有標本都采用的是熒光標記， 但決不能將LSCM認為就是一種“高質(zhì)量圖像的熒光顯微鏡”. 共聚焦顯微鏡并不總是熒光檢測的最好工具。 共聚焦顯微鏡能同時或序貫檢測多種熒光通道，但不能將共聚焦顯微鏡簡單地作為一種共存研究的工具。 共聚焦顯微鏡真正的威力是依賴于其強烈抑制焦平面外熒光信號的能力，有很好的深度分辨能力或光學切片功能�；�于該性質(zhì)的應(yīng)用包括: 樣品的顯微斷層掃描 (microscopic CT) Z掃描切片的3-D 重建厚樣品的分辨率 多通道同時檢測，可實時檢測細胞的生理活動和形態(tài)變化: 生理學研究：如細胞內(nèi)各種離子濃度隨時間的變化情況. 活細胞多種標記物同時進行成像，動態(tài)觀察不同形態(tài)學事件的發(fā)生。如分泌顆粒的分泌過程。 A confocal optical section demonstrates that during telophase， microtubules (red) form a phragmoplast(桶狀紡綞體 ) array and peroxisomes (green) aggregate immediately inside these.  The DNA in the nuclei is stained blue.  Image from Collings et al. (2003). The role of hyaluronan in renal stone disease http://www.glycoforum.gr.jp/science/hyaluronan/HA29/HA29E.html Hyaluronan is expressed by proliferating renal tubular cells in subconfluent cultures (2 days post-seeding). At cell-cell contact (4 days post-seeding) this staining starts to fade away to completely disappear when the tight junctions are assembled (5-6 days post-seeding). The hyaluronan receptor CD44 is also expressed at the luminal surface in subconfluent cultures (2 days post-seeding)， at cell-cell contact CD44 is targeted to lateral spaces， whereas at confluence (6 days post-seeding)， CD44 is exclusively expressed at basal domains of the plasma membrane. 量子點具有較大的斯托克位移和狹窄對稱的熒光譜 A QD-EGF binds and activates cells expressing a GFP-fused EGFR. (a) Red QD-EGF and green GFP-EGFR colocalize on the cell membrane within minutes and (b) are rapidly internalized together into endosomes in the cytoplasm. (c) Individual receptors on long sensory filaments called filopodia can be visualized by QD-EGF binding. Images are single confocal sections through living cells. Snapshots in time showing retrograde transport of QD-EGF-receptor-activated complexes on a filopodium 還可進行脈沖追蹤實驗(pulse-chase experiments)，觀察融合內(nèi)體的壽命. In pulse-chase experiments using two different colors of QD-EGF， binding and endocytosis of orange QD-EGF by EGFR was followed 22min later by blue QD-EGF. Few endosomes contain both colors of QDs (purple dots) when the pulses are separated by more than 15min 通過與特定蛋白質(zhì)偶聯(lián)(如螢蟲素酶)，形成生物傳感器，測定生物體內(nèi)物質(zhì)的特性 生物芯片技術(shù)：量子點色彩的多樣性滿足了對生物高分子（蛋白質(zhì)、DNA）所蘊含海量信息進行分析的要求：用量子點檢測腫瘤細胞小結(jié) 總的來說，由于量子點技術(shù)有其獨特的標記特點，它必將成為今后生物分子檢測的尖端技術(shù)，為DNA 檢測(DNA 芯片) 、蛋白質(zhì)檢測(蛋白質(zhì)芯片) 和探索蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)之間(抗原－抗體、配體－受體、酶－底物) 反應(yīng)原理提供更先進的方法。同時也將極大的推動生物顯像技術(shù)和生物制藥技術(shù)的迅猛發(fā)展，給疾病的診斷和治療帶來巨大進步。TYB紅軟基地

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